Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста»
Анаплазмоз крупного рогатого скота (КРС) — трансмиссивное инфекционное заболевание, вызываемое риккетсиями Anaplasma marginale (отряд Riсkettsiales, семейство Anaplasmatacеa).Своевременная диагностика играет решающую роль в предотвращении распространения анаплазмоза КРС. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени в настоящее время используется для молекулярной диагностики инфекционных заболеваний благодаря высокой чувствительности и специфичности, а также возможности проводить оценку уровня бактериальной и вирусной нагрузки. Целью проведенного исследования было апробировать модифицированный метод на основе ПЦР в реальном времени и оценить уровень паразитемии у КРС, инфицированного A. marginale. По результатам ПЦР в режиме реального времени с использованием пары видоспецифичных праймеров и флуореcцентно-меченого зонда к гену msp4 A. marginale выявлены животные-анаплазмоносители и определен уровень паразитемии, который находился в пределах 3,01×104 - 5,42×105 анаплазм на мл крови. Описанный метод определения уровня паразитемии может быть использован для оценки эффективности лечения инфицированных животных и вакцин против анаплазмоза КРС.
1. Гулюкин М.И., Заблоцкий В.Т., Белименко В.В. Мониторинг эпизоотической ситуации по протозойным кровепаразитарным болезням домашних животных в Российской Федерации (2007–2012) // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. – 2013. – № 2. – С. 36-40
2. Георгиу Х., Белименко В.В. Современные лабораторные методы диагностики анаплазмоза крупного рогатого скота и овец // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. – 2014. – №3. – С. 31-32.
3. Ковальчук С.Н., Косовский Г.Ю., Архипов А.В., Глазко. Т.Т., Глазко В.И. Разработка метода выявления Anaplasma marginale с использованием ПЦР в реальном времени // Сельскохозяйственная биология. – 2015. −Т. 50. – № 6. – С. 825-831.
4. Либерман Е.Л., Хлызова Т.А. Зависимость инвазирования крупного рогатого скота анаплазмозом от численности насекомых комплекса «Гнус» // Educatio. − 2015. − № 3. − С. 46-50.
5. Ait Hamou S., Rahali T., Sahibi H., Belghyti D., Losson B., Goff W., Rhalem A. Molecular and serological prevalence of Anaplasma marginale in cattle of North Central Morocco // Res. Vet. Sci. − 2012. − Vol. 93. −1318-1323.
6. Brayton K.A., Kappmeyer L.S., Herndon D.R., Dark M.J., Tibbals D.L., Palmer G.H., McGuire T.C., Knowles D.P.Jr. Complete genome sequencing of Anaplasma marginale reveals that the surface is skewed to two superfamilies of outer membrane proteins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. − 2005. − Vol. 102. − No. 3. − P. 844-849.
7. Belkahia H., Ben Said M., Alberti A., Abdi K., Issaoui Z., Hattab D., Gharbi M., Messadi L. First molecular survey and novel genetic variants' identification of Anaplasma marginale, A. centrale and A. bovis in cattle from Tunisia // Infect. Genet. Evol. − 2015. − Vol. 34. − P. 361-371.
8. Carelli G., Decaro N., Lorusso A., Elia G., Lorusso E., Mari V., Ceci L., Buonavoglia C. Detection and quantification of Anaplasma marginale DNA in blood samples of cattle by real-time PCR // Vet. Microbiol. − 2007. − Vol. 124. − P. 107-114.
9. Decaro, N., Carelli, G., Lorusso, E., Lucente, M.S., Greco, G., Lorusso, A., Radogna, A., Ceci, L., Buonavoglia, C. Duplex real-time polymerase chain reaction for simultaneous detection and quantification of Anaplasma marginale and Anaplasma centrale // J. Vet. Diagn. Invest. − 2008. − Vol. 20. − P. 606–611.
10. De la Fuente J., Lew A., Lutz H., Meli M.L., Hofmann-Lehmann R., Shkap V. Genetic diversity of Anaplasma species major surface proteins and implications for anaplasmosis serodiagnosis and vaccine development // Anim. Health Res Rev. – 2005. –Vol. 6. – P. 75-89.
11. Dreher U.M., de la Fuente J., Hofmann-Lehmann R., Meli M.L., Pusterla N., Kocan K.M., Woldehiwet Z., Braun U., Regula G., Staerk K. D., Lutz H. Serologic crossreactivity between Anaplasma marginale and Anaplasma phagocytophilum // Clin. Diagn. Lab. Immunol. − 2005. − Vol. 12. − No. 10. − P. 1177– 1183.
12. Fyumagwa R.D., Simmler P., Meli M.L., Hoare R., Hofmann-Lehmann R., Lutz H. Prevalence of Anaplasma marginale in different tick species from Ngorongoro Crater, Tanzania // Vet. Parasitol. − 2009. − Vol. 161. − No. 1-2. − P. 154-157.
13. Guglielmone A. A. Epidemiology of babesiosis and anaplasmosis in South and Central America // Vet. Parasitol. – 1995 – Vol. 57. – P. 109-119.
14. Kocan K.M., de la Fuente J., Blouin E.F., Coetzee J.F., Ewing S.A. The natural history of Anaplasma marginale // Vet. Parasitol. – 2010 – Vol. 167. – P. 95-107.
15. Kubelová M., Mazancová J., Siroký P. Theileria, Babesia, and Anaplasma detected by PCR in ruminant herds at Bié Province, Angola // Parasite. −2012. − Vol. 19. − P. 417-422.
16. Löhr C.V., Rurangirwa F.R., McElwain T.F., Stiller D., Palmer G.H. Specific expression of Anaplasma marginale major surface protein 2 salivary gland variants occurs in the midgut and is an early event during tick transmission // Infect. Immun. − 2002. − Vol. 70. − P. 114-120.
17. Mutshembele A.M., Cabezas-Cruz A., Mtshali M.S., Thekisoe O.M., Galindo R.C., de la Fuente J. Epidemiology and evolution of the genetic variability of Anaplasma marginale in South Africa // Ticks Tick Borne Dis. − 2014. − Vol. 5. − P. 624-631.
18. Picoloto G., Lima R. F., Olegário L. A., Carvalho C. M., Lacerda A. C., Tomás W. M., Borges P. A., Pellegrin A. O., Madruga C. R. Real-time polymerase chain reaction to diagnose Anaplasma marginale in cattle and deer (Ozotoceros bezoarticus leucogaster) of the Brazilian Pantanal // Rev. Bras. Parasitol. Vet. − 2010. − Vol. 19. − P.186-188.
19. Reinbold J. B., Coetzee J. F., Sirigireddy K. R., Ganta R. R. Detection of Anaplasma marginale and A.phagocytophilum in bovine peripheral blood samples by duplex real-time reverse transcriptase PCR assay // J. Clin. Microbiol. − 2010. − Vol 48. − P. 2424-2432.
20. Wall D.T. Anaplasmosis control and diagnosis in South Africa // Ann. N.Y. Acad. Sci. – 2000. – No. 916. – P. 474-83.
21. Zhou M., Cao S., Sevinc F., Sevinc M., Ceylan O., Moumouni P. F., Jirapattharasate C., Liu M., Wang G., Iguchi A., Vudriko P., Suzuki H., Xuan X. Molecular detection and genetic identification of Babesia bigemina, Theileria annulata, Theileria orientalis and Anaplasma marginale in Turkey // Ticks Tick Borne. Dis. − 2016. − Vol. 7. − P. 126-134.