Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста»
Предложен новый метод оценки биологического действия наночастиц с использованием штамма экстремофильных дрожжей Yarrowia lipolytica, экспрессирующих ген жёлтого флуоресцентного белкаEYFP. Показано, что хемилюминесценция люминола in vivo свободными формами кислорода за счет работы дыхательной цепи митохондрий способна возбуждать флуоресценцию EYFP. Этот эффект существенно возрастает при обработке культуры наночастицами различного химического состава. Сделанное наблюдение позволяет разработать автоматический анализатор на базе люминометра, позволяющий проводить экспресс-анализ токсичности наночастиц.
1. Гусева М.А., Эпова Е.Ю., Осипенкова О.В., Елагина Е.М., Шевелев А.Б. Молекулярные маркеры адаптации к росту при высоких значениях pН у экстремофильных дрожжей Yarrowia lipolytica. Международный журнал экспериментального образования, 2011, 3: 63-64.
2. Хрульнова С.А., Манухов И.В., Зарубина А.П., Завильгельский Г.Б. Aliivibrio logei, штамм KCh1 (изолят Камчатка): биохимические и люминесцентные характеристики, клонирование lux-оперона. Микробиология, 2010, 79: 349–355.
3. Davidow L.S., Kaczmarek F.S., De Zeeuw J.R., Conlon S.W., Lauth M.R., Pereira D.A., Franke A.E. The Yarrowia lipolytica LEU2 gene. Curr. Genet., 1987, 5: 377-383.
4. Donaldson K., Stone V. Current hypotheses on the mechanisms of toxicity of ultrafine particles. Ann. Ist. Super Sanita, 2003, 39(3): 405-410.
5. Elder A.C.P. The Toxicology of Nanomaterials. Univ. of Rochester, 2007: 37.
6. Lopes S., Ribeiro F., Wojnarowicz J., Lojkowski W., Jurkschat K., Crossley A., Soares A.M., Loureiro S. Zinc oxide nanoparticles toxicity to Daphnia magna: Size dependent effects and dissolution. Environ. Toxicol. Chem., 2013, 10: 1002-2413.
7. Madzak C., Tréton B., Blanchin-Roland S. Strong hybrid promoters and integrative expression/secretion vectors for quasi-constitutive expression of heterologous proteins in the yeast Yarrowia lipolytica. J. Mol. Microbiol. Biotechnol., 2000, 2: 207-216.
8. Manukhov I.V., Khrul'nova S.A., Baranova A., Zavilgelsky G.B. Comparative analysis of the lux operons in Aliivibrio logei KCh1 (Kamchatka isolate) and Aliivibrio salmonicida. J. Bacteriol., 2011, 193(15): 3998-4001.
9. Mueller S., Arnhold J. Fast and sensitive chemiluminescence determination of H2O2 concentration in stimulated human neutrophils. J. Biolum. Chemilum, 1995, 10: 229–237