Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста»
Для получения значительного количества полноценных зрелых яйцеклеток и зигот крупного рогатого скота вне организма необходим поиск оптимальных условий и состава культуральных сред. Поскольку большая часть ооцитов, выделенных из яичников коров, подвергается преждевременному мейотическому созреванию без подготовки ооплазмы, это создаёт одно из главных препятствий для их полноценного оплодотворения и развития in vitro. Цель данной работы − изучить влияние цАМФ в малой концентрации на процесс возобновления мейоза и последующее оплодотворение яйцеклеток КРС in vitro, т.е. выяснить возможность синхронизации ядерного и цитоплазматического созревания ооцитов КРС. Оценивали влияние экзогенного цАМФ, введённого в аналогичную среду созревания ооцитов КРС в течение первых 6 ч, на их созревание и последующее оплодотворение. Показано, что присутствие цАМФ в среде созревания в течение первых 6 ч в концентрации 100 мкМ не оказывало существенного влияния на возобновление мейоза в ооцитах КРС (69% в контрольной группе, 71.6% в опытной, P> 0.1). Не наблюдалось существенной разницы между контролем и опытом по процентной доле общей пенетрации (63.3 и 67,4%, P>0.1), и нормального оплодотворения (2 пронуклеуса) (43,3 и 52,8%, P> 0.05). Полученные данные имеют значение для дальнейшей работы по синхронизации ядерного и цитоплазматического созревания ооцитов КРС в условиях in vitro
1. Журавлёва Н.И., Рябых В.П. Влияние циклического аденозинмонофосфата на динамику белкового спектра в ооцитах крупного рогатого скота при дозревании in vitro. // Материалы I Республиканской конференция “Биотехнологические достижения и перспективы их развития”. Львов, 1990, 16-18 сентября. С. 15.
2. Сметанина И.Г., Татаринова Л.В., Кривохарченко А.С. Влияние состава культуральных сред на созревание ооцитов и развитие эмбрионов крупного рогатого скота in vitro. // Онтогенез. 2000. Т. 31. № 2. С. 139-143.
3. Anderson G.B. Advances in large mammalian embryo culture. // In: Methods in Mammalian Reproduction. (Daniel J.C., ed.). N.Y.: Academic Press, 1978. P. 273-284.
4. Bavister B.D., Yanagimachi R. The effect of sperm extract and energy sources on the motility and acrocome reaction of hamster sperm in vitro. // Biol. Reprod. 1977. Vol. 16. P. 228-237.
5. Bavister B.D., Leibfried M.L., Lieberman G. Development of preimplantation embryos of the golden hamster in a defined culture medium. // Biol. Reprod. 1983. Vol. 28. P. 235-247.
6. Bavister B.D. A consistently successful procedure for in vitro fertilization of golden hamster egg. // Gamete Research. 1989. Vol. 23. P. 139-158.
7. Cho W.U., Stern S., Biggers J.D. Inhibitory effect of dibutyryl cAMP on mouse oocyte maturation in vitro. // J. Exp. Zool. 1974. Vol. 187. P. 783-786.
8. Funahashi H., Cantley T.C., Day B.N. Synchronization of meiosis in porcine oocytes by exposure to dibutyryl cyclic adenosine monophosphate improves developmental competence following in vitro fertilization. // Biol. Reprod. 1997. Vol. 57. P.49-53.
9. Homa S.T. Effects of cyclic AMF on the spontaneous meiotic maturation of cumulus-free bovine oocytes cultured in chemically defined medium. // J. Exp. Zool. 1988. Vol. 248. P. 222-231.
10. Kastrop P.M.M., Bevers M.M., Destree O.H.J., Kruip Th.A.M. Changes in protein synthesis and phoshporylation patterns bovine oocyte maturation in vitro. // J. Reprod. Fert. 1990. Vol. 90. P. 305-310.
11. Kastrop P.M.M., Bevers M.M., Destree O.H.J., Kruip Th.A.M. Protein synthesis and phoshporylation patterns of bovine oocyte maturing in vivo. // Mol. Reprod. Dev. 1990. Vol. 90. P. 305-310.
12. Kuyt J.R.M., Kruip T.A.M., De Jong-Brink M. Cytochemical localization of adenylate cyclase in bovine cumulus-oocytes complexes. // Exp. Cell. Res. 1988. Vol. 174. P. 139-145.
13. Luciano A.M., Pocar P., Milanesi E., Modina S., Rieger D., Lauria A., Gandolfi F. Effect of different levels of intracellular cAMF on the in vitro maturation of cattle oocytes and their subsequent development following in vitro fertilization. // Mol. Reprod. Dev. 1999. Vol. 54. P. 86-91.
14. Mattioli R., Galeati G., Barboni B., Seren E. Concentration of cyclic AMF during the maturation of pig oocytes in vivo and in vitro. // J. Reprod. Fert. 1994. Vol. 100. P. 403-409.
15. Parrish J.J., Susko-Parrish J.L., First N.L. Effect of heparin and chondroitin sulfate on the acrosome reaction and fertility of bovine sperm in vitro. // Theriogenology. 1985. Vol. 24. P. 237-249.
16. Parrish J.J., Susko-Parrish J.L., Leibfried-Rutledge M.L. et al. Bovine in vitro fertilization with frozen-thawed semen. // Theriogenlogy. 1986. Vol. 25. P. 591-600.
17. Sirard M.A., First N.L. In vitro inhibition of oocytes nuclear maturation in the bovine. // Biol. Reprod. 1988. Vol. 39. P. 229-234.
18. Sirard M.A.,Florman H.M., Leibfried-Rutledge M.L., Barnes F.L., Sims M.L., First N.L. Timing of nuclear progression and protein synthesis necessary for meiotic maturation of bovine oocytes. // Biol. Reprod. 1989. Vol. 40. P. 1257-1263.
19. Schultz R.M., Montgomery R.R., Ward-Bailey P.F., Eppig J.J. Regulation of oocyte maturation in the mouse: possible roles of intercellular communication, cAMF and testosterone. // Dev. Biol. 1983. Vol. 95. P. 294-304.
20. Van Blercom J., McGaughey R.W. Molecular differentiation of the rabbit ovum during oocyte maturation in vivo and in vitro. // Dev. Biol. 1978. Vol. 63. P. 139-150.