Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста»
Технология получения генно-модифицированных животных на сегодняшний день имеет множество спорных моментов, требующих уточнения и более подробного исследования. При проведении экспериментов с ранними эмбрионами требуется совершенное владение эмбриологическими методиками и использование современных технологий. Цель данной работы – систематизация этих методик, отработанных авторами в ходе длительных исследований по получению животных – продуцентов рекомбинантных белков с молоком. Описаны условия содержания модельных животных (мышей), методики индукции суперовуляции у мышей-доноров эмбрионов и получения зигот, микроинъекции генно-инженерной конструкции в пронуклеусы, культивирования зигот, подготовки вазэктомированных самцов, псевдобеременных самок и трансплантации эмбрионов. Комплекс отработанных методик использован в исследованиях по получению модельных животных, экспрессирующих в молоко лактоферрин и гранулоцит-колониестимулирующий фактор, а также других трансгенных животных.
1. Гловер Д. Новое в клонировании ДНК. Методы. – М.: Мир, 1988. – 538 с.
2. Каркищенко Н.Н., Грачев С.В. (Ред.) Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях. – М.: Профиль, 2010. – 358 c.
3. Кораблев А.Н., Серова И.А., Скрябин Б.В. Манипуляции с ранними эмбрионами мыши для создания генетически модифицированных животных // Вавиловский журнал генетики и селекции. – 2017. – 21. – No. 7. – С. 758- 763.
4. Манк М. Биология развития млекопитающих. Методы. – М.: Мир, 1990. – 406 с.
5. Auerbach A., Norinsky R., Ho W., Losos K., Guo Q., Chatterjee S., Joyner A. Strain-dependent differences in the efficiency of transgenic mouse production // Transgenic Research. – 2003. – Vol. 12. – No.1. – P. 59-69.
6. Lars M., Jürgen G. Pronuclear injection for the production of transgenic mice // Nature Protocols. – 2007. – VOL. 2. – P. 1206-1215.
7. Shinnosuke S., Tomoyuki T., Takehito K., Hiroshi I., and Naojiro M. A hyperactive piggyBac transposon system is an easy-to-implement method for introducing foreign genes into mouse preimplantation embryos // J. Reprod. Dev. – 2015. –Vol. 61. – No. 3. – P. 241-244.
8. Xiuzhi T., Feng W., Lu Z., Pengyun J., Jing W., Dongying L., Guangdong L., Menglong C., Zhengxing L., Guoshi L. Melatonin promotes the in vitro development of microinjected pronuclear mouse embryos via its anti-oxidative and anti-apoptotic effects // Int. J. Mol. Sci. – 2017. –Vol. 18. – No. 5. – P. 988.